La principal diferencia entre el burro y la mula es que el burro es un animal fértil que pertenece a la especie Equus Africanus Asinus, mientras que la mula es un híbrido estéril que pertenece a la especie denominada Equus Asinus o Equus Caballus, producido por el cruce entre un burro macho y un caballo hembra (yegua).

El burro es una raza pura, mientras que la mula es el animal híbrido. Un burro pesa de aproximadamente de 80 a 480 kg; por otro lado, la mula tiene más altura que el burro y un peso de unos 370 a 460 kg. El promedio de vida del burro es de unos 30 a 50 años, mientras que la mula tiene un promedio de vida de unos 30 a 40 años.

El burro es considerado un animal intransigente, robusto y menos inteligente, mientras que la mula es paciente, más inteligente que un caballo y de paso seguro.

Los burros no tienen una quinta vértebra lumbar, por otro lado, las mulas pueden tener la quinta vértebra lumbar. El color del burro puede variar de gris, marrón oscuro a negro, mientras que el color de la mula puede incluir gris, negro y ante.

El burro tiene 62 cromosomas, por otra parte, la mula tiene 63 cromosomas.